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ELISA實(shí)驗(yàn)的原理和常見辦法
  • 發(fā)布日期:2021-08-11      瀏覽次數(shù):3838

    • ELISA實(shí)驗(yàn)是科研人員經(jīng)常用到的實(shí)驗(yàn)方法。很多人覺得ELISA很簡(jiǎn)單,其實(shí)不然?,F(xiàn)在我們一起了解下ELISA實(shí)驗(yàn)的原理和常見辦法。


      實(shí)驗(yàn)原理:

       1.包被:抗原/抗體,固相化
       2.反響: 1)待測(cè)抗體/抗原; 2)酶標(biāo)抗原/抗體
       3.洗滌:使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的別離
       4.底物顯色:定性/定量剖析
       

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      常用辦法:
       1. 間接法
       檢測(cè)抗體常用的辦法, 首要用于對(duì)病原體抗體的檢測(cè)。
       優(yōu)勢(shì):二抗能夠加強(qiáng)信號(hào),并且有多種挑選能做不同的測(cè)定剖析。不加酶符號(hào)的一級(jí)抗體則能保留它多的免疫反響性。
       缺陷:交互反響發(fā)生的機(jī)率較高
       2. 雙抗體夾心法
       檢測(cè)大分子抗原常用的辦法。
       優(yōu)勢(shì):高活絡(luò)、高專一性,抗原無須事前純化。
       缺陷:抗原必定得具有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。
       3. 競(jìng)爭(zhēng)法
       檢測(cè)小分子半抗原(藥物、激素等)。
       優(yōu)勢(shì):可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
       缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。

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