公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

二、細胞培養(yǎng)操作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

     b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項 

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由 客戶自行承擔。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

phospho-MLC(Ser20)： 0酸化肌球蛋白輕鏈抗體 MGC80-3細胞，胃癌細胞 人喉癌細胞,TU212細胞 正常大鼠腎細胞;NRK

KDR Others Mouse 小鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠細胞色素P450 3A4(CYP3A4)ELISA試劑盒 IL-1 Beta(Human Interleukin 1 Beta)  人白介素1β (IL-1B) 96T

MuRF1/Trim63： 肌肉細胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體 人角膜上皮細胞cDNAHCEpiC cDNA

CAL 27人舌鱗癌細胞 Human tongue squamous cell carcinoma cell line CAL 27 DMEM+10% FBS 大鼠細胞色素P450 1A1(CYP1A1)ELISA試劑盒 T 睪酮 96T

MAFbx/Fbx32： 泛素蛋白連接酶抗體 RSPO1 Others Human 人 R-Spondin 1 / RSPO1 人細胞裂解液 (陽性對照)

CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽) 人乙?；?span>(CHAc)ELISA 試劑盒 HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原 0.5mg

HOMER2： HOMER2抗體 ENPP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 ENPP3 / CD203c 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

人胰島β細胞培養(yǎng)基 100mL 人酯轉移蛋白(CETP)ELISA 試劑盒 HLA-E 人類白細胞抗原E 0.5mg

HDBP2： 瘤病毒調控因子1抗體 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5 腎透明細胞腺癌，786-0細胞 A-375 [A375](惡性黑色素瘤細胞)

REG3A Others Rat 大鼠 REG3A 人細胞裂解液 (陽性對照) (CH)ELISA試劑盒 Anti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原 0.5mg

Ishikawa人子宮內膜癌細胞PSGR： 前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體/嗅覺受體51E2抗體 CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H345(懸浮) 小細胞肺癌 大鼠低密度脂蛋白受體相關蛋白5(LRP5)ELISA試劑盒 FS(Human Follistatin)  人卵泡抑素 96T

P2Y11： G蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y11抗體 THP1細胞，人單核細胞型淋巴瘤 人導管瘤細胞,BT-474細胞 非必需氨基酸　100XNEAA

CD83 Others Mouse 小鼠 CD83 / HB15 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP-1)ELISA試劑盒 TAb(Human Parathyroid Hormone Related Protein)  人甲狀腺素抗體 猴源細胞

NCI-N87 [N87]人胃癌細胞 大鼠低密度脂蛋白受體(LDLR)ELISA試劑盒 CA(Human catecholamine)  人兒茶酚胺 96T