要完成一項(xiàng)漂亮的ELISA實(shí)驗(yàn)，不光要做足實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備，還要對(duì)其他各種輔助材料有所了解，這其中防腐劑的運(yùn)用很重要，ELISA試劑盒中常用的防腐劑有：
1.疊氮鈉是HRP的抑制劑，凡是和HRP接觸的試劑，一定不能用；
2.硫柳汞在ELISA試劑中可普遍使用，但因其有毒，較少使用；
3. 市面許多試劑盒產(chǎn)品，用抗生素做防腐劑較多，如慶大。
4. 如果試劑僅在實(shí)驗(yàn)室短期使用，其實(shí)并不需加防腐劑，常規(guī)試劑放4度冰箱，抗體、酶等加甘油分裝凍存即可。
5. 防污染可添加0.02%的疊氮鈉，或0.01%的硫柳汞。疊氮鈉在多數(shù)情況下有用且有效，但在有些實(shí)驗(yàn)中卻不合適，因?yàn)樗茏钄嗉?xì)胞的電子傳遞鏈，對(duì)許多生物體都有毒性，因此不能用于活體實(shí)驗(yàn)；因?yàn)楹邪被芨蓴_許多標(biāo)記方法；不能用于辣根過氧化物酶標(biāo)記的抗體。而硫柳汞不含氨基，不影響基質(zhì)的穩(wěn)定性。如果將抗體應(yīng)用于生物活性檢測(cè)、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，一般不使用任何防腐劑，這些實(shí)驗(yàn)用的抗體應(yīng)少量分裝冷存，切忌反復(fù)凍融。
6. 吐溫-20是作為穩(wěn)定劑，可減少非特異性黏合。
7.甘油是防止凍融過程中的固-液相變而引起蛋白變性，能有效地增強(qiáng)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，-20度凍存時(shí)甘油的濃度可以在20~30%。
